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巨噬細胞清除劑的脂質體Liposomes常見制備方法

更新時間:2023-06-22   點擊次數:1532次

耗竭清除巨噬細胞(Depletion of macrophages)是研究巨噬細胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開發的一款Clodronate Liposomes,貨號:CP-005-005,可以利用巨噬細胞的內吞機制,將膜不通透性的氯磷酸二鈉(Clodronate)帶入細胞內,氯磷酸二鈉被釋放,當達到一定的濃度時可引發巨噬細胞的凋亡,從而達到去除巨噬細胞的目的。配合PBS脂質體用于對照組實驗,以了解巨噬細胞的消耗是否歸因于注射氯磷酸二鈉脂質體后產生的效果。


脂質體Liposomes是由一層或多層的磷脂分子構成的微小囊泡,被廣泛應用于藥物傳遞、基因轉移、生物傳感、成像檢測等領域。


靶點科技介紹脂質體的常見制備方法。


1. 脂質體的基礎結構

在制備脂質體之前,需要了解脂質體的基礎結構,以更好地理解它們的制備過程。脂質體由一個或多個磷脂分子和一個或多個膽固醇分子,以及其他輔助物質(如表面活性劑、離子、蛋白質等)構成。在生物體系中,脂質體是細胞膜的重要組成部分,對于維持細胞內外環境平衡、物質傳遞等具有重要作用。


2. 制備脂質體的基本步驟

制備脂質體的基本步驟包括:

(1)選取適當配比的磷脂分子和膽固醇分子,并將它們混合在一起;


(2)加入脂質體所需的其他輔助物質,如表面活性劑、離子、蛋白質等,以便改進脂質體的性質;


(3)用適當的方法將混合物分散成微小的囊泡,使其形成脂質體。


靶點科技將分別介紹每個步驟的常用方法。


3. 選取磷脂和膽固醇

所選擇的磷脂和膽固醇組合對脂質體的特性和功能有很大的影響。常用的磷脂包括卵磷脂、磷脂酰肌醇、羥基磷脂、磷脂酰絲氨酸等。卵磷脂常被用于脂質體制備中,因為它與膽固醇的組合效果好,形成脂質體的韌性和穩定性更好。而膽固醇是必須的輔助成分,它可使脂質體抗溶解力增強,并且可以提高其透過細胞壁的能力。


4. 加入其他輔助物質

在制備過程中,可以加入表面活性劑或其他分子,以增強脂質體的性質。如二十烷基磺酸鈉(SDS)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)等,加入后可以使脂質體的穩定性大大提高。


5. 制備脂質體

有多種方法可以制備脂質體,其中兩種較為常見的方法如下。

(1)通過機械分散法制備脂質體

這是常用的方法之一。首先需要將所選的磷脂分子和膽固醇混合在一起,并將其溶解到有機溶劑(如甲醇、氯仿等)中。隨后將混合物加入離心管中,將所需的其他輔助物質一起加入。接著,使用超聲或高壓處理將液體分散成一個微小的泡泡——脂質體。


(2)通過溶劑蒸發冷凝法制備脂質體

這種方法與機械分散法略有不同。選擇適當的溶劑蒸發冷凝劑將所選的磷脂和其他成分混合在一起,形成脂質體。該方法的優點在于無需使用超聲波或高壓力,操作比較簡單,且制備效率較高。其中,常用的溶劑蒸發冷凝劑有乙酸乙酯/乙醇、氯仿/甲醇、N,N-二甲基乙酰胺(DMSO)/水等。


6. 脂質體的應用

制備好的脂質體在藥物和基因傳遞等領域中具有廣泛應用。為了達到最佳效果,脂質體需要以適當的濃度和用途用于預定的細胞或生物體系中。例如,脂質體和藥物的相互作用可以促進藥物的運輸和傳輸,提高藥物的生物利用度;而基因載體脂質體可以在細胞內部進行基因轉移,從而實現相應的基因治療。


脂質體的制備方法有很多,但它們的基礎結構和特性大致相同。在制備過程中,需要選取適當的磷脂和膽固醇、加入其他輔助物質,并用適當的方法制備脂質體。在實際應用中,需要根據脂質體的特性和細胞的需要來選擇合適的方法和條件。

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