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懸浮細(xì)胞做好免疫熒光的關(guān)鍵步驟

更新時(shí)間:2023-02-17   點(diǎn)擊次數(shù):3802次

您是否希望懸浮細(xì)胞的免疫熒光像貼壁細(xì)胞一樣容易?現(xiàn)在就是這樣!

靶點(diǎn)科技Shi-fix玻片允許懸浮細(xì)胞分層或直接作為單層生長(zhǎng)。簡(jiǎn)單,無(wú)憂的實(shí)驗(yàn)方案,無(wú)需離心即可將懸浮細(xì)胞固定到載玻片上。只需將細(xì)胞添加到載玻片上,等待30分鐘,用PBS洗滌未結(jié)合的細(xì)胞并繼續(xù)免疫染色(或繼續(xù)培養(yǎng)以獲得所需的細(xì)胞密度)。

這些玻片也可用于染色懸浮細(xì)胞以進(jìn)行顯微鏡檢查,或用于固定懸浮細(xì)胞以進(jìn)行共聚焦顯微鏡檢查。更重要的是,如果需要,您還可以在細(xì)胞附著在玻片上時(shí)刺激它們。您可以像貼壁細(xì)胞一樣處理非貼壁細(xì)胞!

關(guān)鍵步驟:

1. 使用PBS清洗細(xì)胞,并將細(xì)胞重新懸浮于PBS中(2-5 百萬(wàn)個(gè)/ml)

2. 把懸浮細(xì)胞專用免疫熒光玻片放置于12孔或者6孔細(xì)胞培養(yǎng)板孔里,直接滴加細(xì)胞于懸浮細(xì)胞專用免疫熒光玻片上(每個(gè)玻片上20-30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞)

3. 使細(xì)胞附著30分鐘,有些細(xì)胞需要延長(zhǎng)附著時(shí)間,但不要超過(guò)1小時(shí)。使用約2ml PBS沖洗掉未結(jié)合細(xì)胞(切勿直接垂直滴加PBS到玻片上細(xì)胞,可將PBS滴加于板孔里側(cè)邊,然后輕輕搖晃3-5分鐘)

4. 在顯微鏡下檢查細(xì)胞附著情況,如果需要進(jìn)一步培養(yǎng),那么加入1ml培養(yǎng)基即可;若不培養(yǎng)即可直接固定,染色。


四步走,操作示意圖如下:





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